Aislamiento de leucocitos

Las células mononucleares y los granulocitos tienen densidades diferentes, para lo que se utilizan dos reactivos: el histopaque 1119 e histopaque 1077.

Material:

• Sangre total
• Histopaque 1077
• Tubos de ensayo
• Centrífuga
• Pipetas

Procedimiento:

1- Añadir 1 mL de HP-1077 a un tubo de centrifuga.

2- Añadir cuidadosamente 1 mL de HP-1077 cuidadosamente sobre el líquido anterior en el tubo de centrífuga.

3- Añadir 2 mL de sangre en el tubo muy despacio, dejando resbalar sobre la pared del tubo (no pueden quedar mezclados). 

4- Centrifufar a 700 g 30 min.

5- Sacar los tubos de la centrífuga, con cuidado de que no se vuelva a mezclar. 

6- Introducir una pipeta pasteur hasta que la punta contacte con la capa de células mononucleares, para aspirar suavemente esta capa.

7- Transferir a otro tubo.

8- Lavar con solución salina (4-5 mL) tres veces.

9- Resuspender el botón en solución salina y observar en cámara de Neubauer.