PRÁCTICA 3: OBSERVACIÓN DE PREPARACIONES EN FRESCO Y FIJADAS AL MICROSCOPIO

OBJETIVO

- Iniciarse en la técnicas de realización de preparaciones microscópicas.

- Mejorar la destreza en el manejo del microscopio.

MATERIAL

- MICROSCOPIO

- PORTAOBJETOS

- SOPORTE DE TINCIONES

- CUBREOBJETOS

- MECHERO DE GAS O ALCOHOL

- CUENTAGOTAS

- PALILLOS 

- AZUL DE METILENO U OTRO COLORANTE

- PREPARACIONES MICROSCÓPICAS

- ACEITE DE INMERSIÓN

- PAPEL DE FILTRO

ACTIVIDADES A REALIZAR

1. Observación de preparaciones microscópicas con objetivos secos y de inmersión. Después de tener enfocado dibuja lo observado o bien toma una fotografía.

2. Observación de una preparación en fresco.

- OBSERVACIÓN EN FRESCO DE UNA MUESTRA DE SANGRE.

1.) Depositamos una gota de sangre sobre un portaobjetos.

2.) Colocar el cubreobjetos permitiendo que la sangre se extienda por capilaridad.

3.) Sellar la preparación y observar al microscopio. Comenzando por el objetivo de menor aumento y condensador bajo.

 OBSERVACIÓN:

Observamos una muestra de sangre y podemos apreciar claramente la forma ovalada de los glóbulos rojos y por otro lado los glóbulos blancos, y el continuo movimiento de estos en pilas.

- COLORACIÓN VITAL.

1.) Depositamos 2 gotas de sangre y dos gotas de colorante ( proporción 1:1) y aspiramos con una pipeta Pasteur.

2.) Depositamos en un tubo de hemólisis y tapamos con parafilm.

3.) Dejamos en reposo a temperatura ambiente durante 10 minutos.

4.) Al cabo de este tiempo aspiramos una o dos gotas de la mezcla y depositamos sobre un porta.

5. Cubrimos con un cubreobjetos y sellamos con laca de uñas o con el sellador histológico.

6.) Observamos al microscopio con objetivo 40X y condensador bajo.

OBSERVACIÓN:

Al realizar el frotis con sangre y teñirlo, se observa a través del microscopio perfectamente teñidos los laterales de los glóbulos blancos y de este modo se aprecia con claridad el núcleo de los glóbulos blancos, diferenciándose los distintos tipos; basófilos, neutrófilos y eosinófilos.

3. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EPITELIALES DE LA BOCA

1.) Raspa la cara interior de la mejilla del labio inferior con una espátula o palillo de madera de borde romo. Descarta el depósito mucoso obtenido y raspa nuevamente el mismo lugar.

2.) Extiende el raspado sobre un portaobjetos. 

3.) Fije el preparado con una gota de metanol 95%.

4.) Seca el frotis al aire.

5.) Tiñe con azu de metileno o hematoxilina.

6.) Lava con agua del grifo.

7.) Deja secar al aire. 

8.) Observa con el microscopio utilizando objetivo 40X y 100X.

OBSERVACIÓN:

Al realizar todos los pasos anteriormente citados se observa al microscopio células de gran tamaño con núcleo más oscuro y el resto de la célula tiene un tono más claro con pequeñas granulaciones.