Determinación cuantitativa de creatinina IVD
FUNDAMENTO
El ensayo esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé.
La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo.
El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.
Intensidad de color proporcional a la concentración de creatinina.
REACTIVOS Y MATERIALES
R1: reactivo pícrico.
R2: reactivo alcalinizante.
CREATININE CAL.
Gradilla, tubos de ensayo, pipetas, puntas de pipeta, agua destilada y cubetas.
PROCEDIMIENTO
1. Ajustar espectrofotómetro:
- Longitud de onda 492 nm.
- Temperatura 37ºC / 15-25ºC.
2. Ajustar espectrofotómetro frente a cero con agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta:
- Blanco : RT (1mL).
- Patrón: RT ( 1mL) y patrón ( 100uL).
- Muestra : RT ( 1mL ) y muestra ( 100 uL).
4. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.
5. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y al cabo de 30 segundos.
6. Calcular la media de las dos asorbancias.
CÁLCULOS Y RESULTADOS :
Muestra ( 30 seg) absorbancia: 0.148A A los (90seg): 0.191A
Patrón ( 30 seg) absorbancia : 0.014A A los ( 90seg): 0.043A
(0.043-0/0.029-0) x 2 = 2.96mg/ dL.
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