PRÁCTICA 16: EASY RID

DESCRIPCIÓN

EASY RID son placas de 12 pozo para la determinación cuantitativa e inmunodifusión radial de las plasmaproteínas humanas, en el suero, plasma y otros líquidos biológicos.

https://www.youtube.com/watch?v=ko3cCY2EHHg

MATERIAL

- Placa de agarosa.

- Micropipeta automática

- Puntas de pipeta

- Suero

- Agua destilada

- Algodón

COMPOSICIÓN

EASY RID contiene, en un estrato de gel de agarosa, el antisuero monoespecífico producido inmunizando conejos o cabras.

PROCEDIMIENTO DEL TEST

1. Extraer la placa EASY RID de su sobre, abrirla y dejarla unos 5 minutos a temperatura ambiente para permitir la evaporización de eventuales  gotitas de agua de condensación en los pozos.

2. Aplicar con pipeta de precisión 5 uL de la muestra cuya concentración de la plasmaproteína se quiere determinar siguiendo las indicaciones .

3. Dejar absorber por unos 20', cerrar la placa con su tapa y volcar; guardar la placa en su sobre y dejarla en un plano, a temperatura ambiente, por 48 horas.

INTERPRETACIÓN 

Medir con la regla al efecto o con lente de medición, e diámetro de los halos en mm. Leer en las tablas adjuntas según el diámetro de los precipitados , el valo de la concentración de proteína.

Importante:

En esta técnica el pipeteo es reverso, es decir, cogemos la mayor cantidad y luego dispensamos apretando la pipeta automática hasta el primer tope.

La vida media de las placas de agar es de 6 meses.

Rango de la placa desde 39.6-512.7

Para el desarrollo de esta práctica hemos utilizado una placa de tres colores, los cuales cada uno corresponde a un determinada plasmaproteína.

Color rojo ( Ig A), verde( Ig G) y azul ( Ig M)

RESULTADO

1.Inmunoglobulinas G (verde):

• pocillo 1 = 8 mm = concentración: 2650 mg/ dL
• pocillo 2 = no se puede calcula ya que esta desplazado
• pocillo 3 = 5 mm = concentración: 700 mg/ dL
• pocillo 4 = no se puede calcular ya que esta desplazado

2. Inmunoglobulinas A ( Rojo):

• pocillo 1 = +9'3 mm = concentración: superior a 634 mg/ dL
• pocillo 2 =  6 mm = concentración: 210 mg / dL
• pocillo 3 = 4 mm = concentración: 42 mg/ dL
• pocillo 4 = 5 mm = concentración: 118 mg/ dL

3. Inmunoglobulinas M (azul) :

• pocillo 1 = 9 mm = concentración: 449 mg/ dL
• pocillo 2 = 6 mm = concentración: 160 mg/ dL
• pocillo 3 = 4 mm = concentración: 32'1 mg/ dL
• pocillo 4 = 3'9 mm = concentración: 27 mg/ dL