RETICULOCITOS

FUNDAMENTO

Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros que contienen, como su nombre indica, un retículo o red cromatínica formada por restos de ARN , mitocondrias y otros órganos celulares.
Su cantidad en sangre periférica es un reflejo de la actividad eritropoyética medular.

Podemos observar los reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción con colorantes vitales, azul de metileno nuevo o azul de cresi brillante. Estos colorantes dann lugar a la precipitación de los restos de ARN, y se observan como filamentos de color azul intenso en el interior de la célula.

MATERIALES

Microscopio óptico
Tubos de hemólisis
Pipetas de Pasteur
Portas
Baño maría
Sistema de filtración

REACTIVOS
Azul de cresil brillante en polvo
Solución salina al 0.9%
Citrato sódico al 3%
Agua destilada
Aceite de inmersión

TÉCNICA

1. Preparación del colorante
Mezclamos 80 ml de solución salina y 20 mL de citrato sódico al 3%.
Pesamos 1g de azul de cresil brillante y lo disolvemos en la mezcla anterior.
Filtramos antes de usarlo.

2. Tinción de reticulocitos:
Es una tinción supravital, es decir, se hace mientras las células aún están vivas.
Para ello echamos  3 gotas de la solución colorante en un tubo de hemólisis y otras 3 gotas de sangre total previamente homogeneizada.
Mezclamos suavemente y tapamos con papel parafilm.
Introducimos en el baño maría a 37 ºC durante 5 min.
Pasado  este tiempo a volvemos a homogeneizar y tomamos una gota de suspensión para depositarla en un porta.
Realizamos una extensión y dejamos secar al aire.

% reticulocitos = nº de reticulocitos contados /nº d hematíes contados  x 100