DETECCIÓN DE LA REACCIÓN DE LA PEROXIDASA EN LEUCOCITOS

FUNDAMENTO

La peroxidasa son catalasas lisosomales que transfieren el hidrógeno desde un donador adecuado.
Entonces el donador se oxida y se transforma en un colorante  insoluble pardo negruzco, que puede utilizarse como indicador de la correspondiente actividad de la peroxidasa.

MATERIALES

R1
R2
R3

PROCEDIMIENTO
 Fijación de los frotis sanguíneos o de médula ósea secados al aire en la mezcla fijadora.
Enjuagar con agua corriente del grifo.
Secar al aire.
Reactivo 1 contiene total de frasco.
Etanol 15mL
Disolver reactivo 1 en etanol y añadirlo a una cubeta de 60 mL según Hellendahl.
Añadir agua destilada resolviendo 45mL.
Añadir rectivo 2 revolviendo : 10gotas.
Añadir reactivo 3 revolviendo : 2 gotas.

TINCIÓN:
Portaobjetos con frotis fijado.
Introducir en solución de tinción recién preparada durante 10 min.
Enjuagar con agua destilada durante 10 segundos.
Secar al aire.
Tinción ulterior  con hemalumbre en solución según Mayer durante 2 min.
Enjuagar con agua corriente del grifo de 3-5 min.
Secr al aire.