La velocidad de formación de NADPH, determinado fotometricamente, es proporcional a la concentración catalítica de CK en la muestra ensayada.
SINGNIFICADO CLÍNICO
La creatina quinasa es una enzima intracelular, distribuida por todo el organismo humano. Su función fisiológica está asociada con adenosina trifosfato (ATP) producida cuando el músculo se contrae.
El nivel de CK en suero está elevado en pacientes con alteraciones del músculo esquelético y en infartos de miocardio.
MATERIALES
- Pipeta
- Puntas de pipeta
- Cubetas
- RT ( R1+R2)
- Suero
- Gradillas de cubetas
PROCEDIMIENTO
1.- Condiciones de ensayo:
Longitud de onda: 340 nm
Temperatura constante: 25ºC/30ºC/37ºC
2. Ajustar el espectofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta :
1 mL de RT + 20 uL de muestra.
4.- Mezclar, incubar dos minutos.
5.- Leer la absorbancia inicial de la muestra, poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
6.- Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto.
RESULTADOS: ABSORBANCIAS
1.- 0.365 nm
2.- 0.349 nm
3.- 0.337 nm
4.- 0.348 nm
Concentración : 105.2
Cálculos:
- 0.365+0.349+0.337+0.348
-105.2 x 8095 = 851594 U/L CK
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