Determinación hemática del grupo sanguíneo ABO en porta

Fundamento:

 Determinar la existencia y así como el tipo de antígeno que posee la membrana del hematíe.

Materiales:

- Anti-A

- Anti-B

- Sangre capilar

- Placa de porcelana con pocillos

- Asa de siembra

Procedimiento:

- Echar una gota de cada reactivo en cada pocillo

- Echar una gota de sangre capilar.

- Mezclar con el asa de siembra.

- Comprobar si existe o no aglutinación.

Determinación de Rh en porta

Fundamento:

Determinar la existencia de los antígenos Rh en la membrana del hematíe.

Materiales:

- Reactivo anti- D
- Suero problema
- Placa con pozos
- Asa para mezclar
- Pipeta pasteur
- Albúmina

PROCEDIMIENTO

 Se coloca una gota de reactivo anti-D en el pocillo, otra gota de suero, y por último echar una gota de albúmina para acelerar el proceso de aglutinación.

Para que se produzca la reacción mezclamos con el asa de siembra para poder observar el resultado.

Si se produce aglutinación quiere decir que existen antígenos Rh en la membrana.
Si no, quiere decir que no existen antígenos.

Método de Duke

FUNDAMENTO

Consiste en determinar el tiempo de sangria tras realizar una punción en lóbulo de la oreja.

MATERIALES

- Lanceta
- Alcohol para desinfectar.
- Tiras de algodón.
- Cronómetro.

Fragilidad capilar

Fundamento:

La presión arterial (PA) es la presión que ejerce la sangre contra la pared de las arterias. Esta presión es imprescindible para que circule la sangre por los vasos sanguíneos y aporte el oxígeno y los nutrientes a todos los órganos del cuerpo para que puedan funcionar. Es un tipo de presión sanguínea.

Material:

No debe confundirse con tensión arterial (TA) que es la presión que los vasos sanguíneos ejercen sobre la sangre circulante.

La presión arterial tiene dos componentes:

• Presión arterial sistólica: corresponde al valor máximo de la tensión arterial en sístole (cuando el corazón se contrae). Se refiere al efecto de presión que ejerce la sangre eyectada del corazón sobre la pared de los vasos.
• Presión arterial diastólica: corresponde al valor mínimo de la tensión arterial cuando el corazón está en diástole o entre latidos cardíacos. Depende fundamentalmente de la resistencia vascular periférica. Se refiere al efecto de distensibilidad de la pared de las arterias, es decir el efecto de presión que ejerce la sangre sobre la pared del vaso.

APTT: Determinación del tiempo de tromboplastina Parcial Activada

Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de un complejo fosfolipidico y un activador soluble en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición de cloruro cálcico hasta la formación del coagulo de la fibrina. La medida del tiempo de APTT, es la determinación mas común junto con la PT, sirve para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los defectos de la coagulación intrínseca ( factor VIII, IX, XI y XII).

Se usa normalmente para la monitorizacion de las terapias anticoagulantes con heparina. 

Materiales:

1. Cubetas de coagulación
2. Coagulometro
3. Pipetas automáticas
4. Puntas de pipetas
5. Gradilla
6. Plasma humano
7. R1 (Ácido elagico)
8. R2 (Cloruro cálcico)
9. Control normal
10. Control patológico

Procedimientos:

• Pipeteamos en el tubo del coagulometro 100 micro - litros de plasma citratado y 100 micro -litros de R1. Mezclamos bien e incubamos exactamente 5 minutos a 37 ºC.

• Pipeteamos 100 micro - litros de R2 y lo mezclamos. Por ultimo, ponemos en marcha el coagulometro y medimos el tiempo de formación del coagulo a partir de la adición del R2 iniciador.

RESULTADOS:

28.8 SEGUNDOS

VALORES DE REFERENCIA:

24-36 SEGUNDOS

PT

FUNDAMENTO

Los factores extrinsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado. El proceso de medición del tiempo de protrombina en una etapa única, mide el tiempo de coagulación del plasma después de la adición del reactivo. Mide factor II, V, VII, X y fibrinogeno así como sus inhibidores.


Materiales:

1. Vaso de precipitado
2. Gradilla
3. RT
4. Control normal
5. Control patológico
6. Coagulometro
7. Pipetas automáticas
8. Puntas de pipeta
9. Cubetas de coagulometro
10. Pipeta aforada
11. Prepipeta
12. Calibrador
13. Plasma humano

PROCEDIMIENTO

• Reconstituimos el RT con 4 mL de agua destilada:

• Pipeteamos 200 micro - litros de RT, incubamos durante 5 minutos a 37 ºC. Luego, pipeteamos 100 micro - litros de plasma citratado. Por ultimo, ponemos en marcha el coagulómetro y miramos los segundos.

• Resultados:

Tasas de PT (PR) = PT del paciente en segundos / PT de plasma normal en segundos.

15.8

VALORES DE REFERENCIA:

PT(segundos) : 13-17 segundos.

PT(porcentaje): 70-120%.

PT(tasa): 0.9-1.2

Aislamiento de leucocitos

Las células mononucleares y los granulocitos tienen densidades diferentes, para lo que se utilizan dos reactivos: el histopaque 1119 e histopaque 1077.

Material:

• Sangre total
• Histopaque 1077
• Tubos de ensayo
• Centrífuga
• Pipetas

Procedimiento:

1- Añadir 1 mL de HP-1077 a un tubo de centrifuga.

2- Añadir cuidadosamente 1 mL de HP-1077 cuidadosamente sobre el líquido anterior en el tubo de centrífuga.

3- Añadir 2 mL de sangre en el tubo muy despacio, dejando resbalar sobre la pared del tubo (no pueden quedar mezclados). 

4- Centrifufar a 700 g 30 min.

5- Sacar los tubos de la centrífuga, con cuidado de que no se vuelva a mezclar. 

6- Introducir una pipeta pasteur hasta que la punta contacte con la capa de células mononucleares, para aspirar suavemente esta capa.

7- Transferir a otro tubo.

8- Lavar con solución salina (4-5 mL) tres veces.

9- Resuspender el botón en solución salina y observar en cámara de Neubauer.